孔雀石绿对整合子捕获耐药性基因盒频率的影响

作者:杜怡青; 胡敏; 申斌; 梁转霞; 罗晓旭; 杨泽华*
来源:山西医科大学学报, 2019, 50(05): 556-560.
DOI:10.13753/j.issn.1007-6611.2019.05.005

摘要

目的通过测定添加与不添加孔雀石绿影响的大肠杆菌BL21(DE3)中整合子的整合频率,研究消毒剂孔雀石绿对整合子捕获耐药性基因盒频率的影响。方法将含有整合子和氨基糖苷腺苷转移酶(aad A2)基因盒的质粒和高表达整合酶的质粒同时导入大肠杆菌工程菌株BL21(DE3)中,命名为HS2。试验组将20株HS2菌株接种于含有20μg/ml孔雀石绿的LB液体培养基中37℃培养16 h,对照组将20株HS2菌株接种于普通LB液体培养基中在37℃下培养16 h。用荧光定量PCR法分别测定两组发生整合的整合子拷贝数和总整合子拷贝数,两数之比即为整合频率。比较两组大肠杆菌的整合频率。结果荧光定量PCR测定对照组的HS2菌株整合频率为(8. 80±2. 61)×10-5,试验组整合频率为(3. 97±3. 79)×10-5。两组差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论孔雀石绿可使整合子捕获耐药基因盒频率下降。

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