环介导恒温扩增法快速检测短小芽孢杆菌

作者：应琪; 李太武; 苏秀榕; 李晔; 周君; 崔静; 王中华; 李松伟

来源：生物技术通报, 2011, (02): 179-183.

• 短小芽孢杆菌
• 环介导恒温扩增技术(LAMP)
• 木聚糖(xynA)基因
• 快速检测 Bacillus pumilus Loop-mediated isothermal amplification(LAMP) Xylanase(xynA)gene Rapid detection

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)是一种能引起食源性疾病的腐败菌,对其进行快速检测具有重要意义。针对短小芽孢杆菌木聚糖(xynA)基因,设计了4条特异性引物(两条内引物和两条外引物),通过条件优化,首次将一种新颖的核酸扩增技术——环介导恒温扩增技术应用于短小芽孢杆菌的快速检测。采用该技术,63℃温育1h的条件下扩增短小芽孢杆菌DNA,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带。PCR和LAMP的检测灵敏度分别约为162和16.2拷贝每反应。结果表明,该方法检测短小芽孢杆菌特异性强、灵敏度高、操作简便、检测成本低,1h即可完成,有望发展成为快速检测短小芽孢杆菌的有效手段。

• 出版日期2011
• 单位宁波城市职业技术学院; 宁波大学