抗BAFF单克隆抗体轻链和重链可变区基因的克隆及鉴定

作者：肖黎明; 龚玖瑜; 王畅; 陈恒悦; 栗向东; 金伯泉; 陈丽华

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (01): 49-52.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006304

• BAFF
• 单克隆抗体
• 轻、重链可变区基因
• 基因克隆 BAFF
• mAb
• variable region of heavy and light chain
• gene cloning

目的:在本实验室成功制备小鼠抗人BAFF单克隆抗体的基础上,通过分子克隆方法获得该抗体可变区基因序列。方法:从1株小鼠抗人BAFF单克隆抗体杂交瘤细胞FMMUB4中提取总RNA,以此为模版反转录成cDNA,用针对小鼠单克隆抗体重链和轻链可变区基因序列的特异性引物分别进行PCR反应,PCR产物连接入载体,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后送测序,测序结果进行生物信息学分析。结果:成功克隆了抗BAFF单克隆抗体FMMUB4重链和轻链可变区基因,测序结果证实序列正确。结论:获得了抗BAFF单克隆抗体FMMUB4重链和轻链可变区基因序列,为下一步构建相关基因工程抗体打下良好基础。

• 出版日期2012
• 单位西京医院; 第四军医大学