H3亚型流感重组腺病毒的纯化工艺研究

作者：张萍; 郭海宁; 解长占; 韩继成; 孙文超; 崔卓栋; 南福龙; 马海彬; 温树波; 肖朋朋; 庄忻雨; 张赫; 张金勇; 赵冠宇; 鲁会军; 金宁一

来源：中国病原生物学杂志, 2016, 11(09): 779-787.

DOI：10.13350/j.cjpb.160903

• H3亚型流感
• 重组腺病毒疫苗
• 纯化

目的为了探索经济、高效的腺病毒的纯化工艺,采用阴离子交换层析和分子筛层析两步法对H3亚型流感重组腺病毒pacAd-H3-EHA-H1HA1new进行纯化,并评价纯化效果。方法利用7L生物反应器培养HEK-293细胞,用于对H3型流感重组腺病毒进行扩增;利用冻融的方法使病毒从细胞中释放,通过阴离子交换层析和分子筛层析法纯化病毒,用分光光度计检测纯化样品的纯度,并测定病毒的滴度和回收率。结果纯化后的样品经PCR鉴定正确,纯化前后的病毒滴度分别为5.6×109 TCID50/ml和1.1×1010 TCID50/ml,纯化后样品纯度(A260/A280值)分别为2.01和1.26,阴离子交换层析纯化的回收率为31.5%,分子筛层析纯化的回收率为81.4%,总回收率为25.6%。结论利用阴离子交换层析和分子筛层析两步法纯化H3亚型流感重组腺病毒的回收率和滴度高,该方法可用于重组腺病毒的纯化。

• 出版日期2016
• 单位吉林大学; 军事医学科学院军事兽医研究所; 吉林农业大学