马尔他布氏杆菌LpxK基因的克隆及原核表达

作者：李国华; 彭冬梅; 李亚颖; 贾晓晓; 朱华培; 徐开莲; 赵天靖; 庞峰; 王凤阳; 杜丽

来源：中国兽医科学, 2015, 45(09): 959-962.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2015.09.013

• 马尔他布氏杆菌
• LpxK基因
• 克隆
• 原核表达

为了克隆马尔他布氏杆菌LpxK基因并对其进行原核表达,根据GenBank中马尔他布氏杆菌M5-90株LpxK基因序列信息设计引物,从M5-90株基因组扩增出1 026bp的目的基因;然后将其连接入pMD20-T载体,转化入大肠杆菌DH5α并测序;测序正确后将目的基因连接入pET-28a(+)质粒,构建重组质粒pET-28a(+)-LpxK,并将其转化入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导其表达,用SDS-PAGE和Western-blot鉴定诱导表达的蛋白。结果表明,成功构建了pET-28a(+)-LpxK原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了LpxK基因,表达的融合蛋白大小约41ku且主要以包涵体形式存在。

• 出版日期2015
• 单位海南大学