拟南芥abi5基因的分子克隆及其在原核细胞中的表达和纯化

作者：马燕林; 马建忠; 王永刚

来源：植物生理学报, 2014, (02): 185-191.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2014.02.004

• 拟南芥
• abi5
• 分子克隆
• 原核表达
• 纯化
• 质谱 Arabidopsis thaliana
• abi5
• molecular cloning
• prokaryotic expression
• purifi cation
• mass

拟南芥abi5基因编码了一个碱性亮氨酸拉链类转录因子,它在ABA信号转导过程中发挥着关键调控作用。本文以拟南芥为材料,通过RT-PCR扩增、克隆了包含abi5基因编码区的片段。核苷酸序列分析表明,所克隆的基因与NCBI数据库收录的abi5基因(GenBank登录号NM_129185.3)有99.0%的一致性;氨基酸序列存在4个残基差异。所克隆的abi5基因被进一步亚克隆至pET-32a表达载体。序列测定核实构建正确的重组质粒(pET32a-ABI5)转化入大肠杆菌BL21 Star(DE3)中诱导表达。表达产物经Ni-NTA亲和层析柱分离纯化、SDS-PAGE分析和质谱鉴定。结果表明,重组ab...

• 出版日期2014
• 单位兰州理工大学