牛整合素β7亚基片段的表达及多抗制备

作者:王海霞; 杨正涛; 陈媛媛; 刘文博; 张雯; 张乃生
来源:中国畜牧兽医, 2011, 38(03): 100-103.

摘要

为制备牛整合素β7亚基片段的多克隆抗体,根据GenBank中牛整合素β7基因序列,合成了β7亚基288 bp(140-427 bp)的cDNA片段,通过DNA重组法构建表达质粒,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。表达产物经Western blotting鉴定,结果证实成功表达了分子质量约为15 ku的β7蛋白。超声破碎细菌后,Ni-NTA树脂进行纯化,免疫兔子获得多抗。间接ELISA检测多抗效价为1∶32000,为进一步研究牛整合素α4β7的功能奠定基础。