高分辨率熔解曲线分析技术在鼠形动物鉴定中的应用

作者：何江; 周鹏程; 崔北金; 吴炳耀; 胡双双; 杨庆贵; 陈峰; 孙立新

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2016, 39(02): 86-90.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2016.02.003

• 高分辨率熔解曲线分析
• 鼠形动物
• Cytb基因

目的探索一种能够快速鉴定常见鼠形动物的新型分子生物学方法。方法以线粒体基因组(mt DNA)细胞色素b(Cytochrome b,Cytb)基因为靶基因,根据Gen Bank公布的序列,设计测序引物,扩增5种常见鼠形动物的目的基因并测序。依据测序结果和Gen Bank公布的序列,设计分析引物,进行高分辨率熔解曲线分析。以新鲜提取的基因组DNA为模板,按照1∶10的比例梯度稀释,检测7个浓度梯度,进行敏感性检测。结果测序引物扩增出5种鼠形动物Cytb序列,分析引物扩增出5种鼠形动物的熔解曲线,并可根据曲线鉴别5种鼠形动物的种类,检测灵敏度为10-2ng/μl。结论利用高分辨率熔解曲线分析技术,可以快速准确鉴定5种常见鼠形动物。

• 出版日期2016
• 单位安徽理工大学; 江苏国际旅行卫生保健中心; 江苏出入境检验检疫局