芪黄补肾泄浊方对肾小球系膜细胞Nrf2/HO-1信号通路的影响

作者：金丽霞; 金丽军; 栾仲秋; 潘超; 马艳春^*

来源：中医药学报, 2020, 48(07): 21-26.

DOI：10.19664/j.cnki.1002-2392.200119

• 芪黄补肾泄浊方
• 人肾小球系膜细胞
• Nrf2/HO-1信号通路

目的:探讨芪黄补肾泄浊方对人肾小球系膜细胞(HMC)核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶(HO-1)信号通路的影响。方法:体外培养HMC细胞,制备芪黄补肾泄浊方的大鼠含药血清,并用芪黄补肾泄浊方药物血清干预,实验分5组,即正常对照组(A组)、高糖组(B组)、芪黄补肾泄浊方低剂量组(C组)、芪黄补肾泄浊方中剂量组(D组)、芪黄补肾泄浊方高剂量组(E组)。A组HMC给予正常大鼠血清的培养液(血清浓度10%)培养,B组HMC予含正常大鼠血清的高糖培养液(血清浓度10%)培养,C组予含芪黄补肾泄浊方低剂量含药血清的高糖培养液(血清浓度10%)培养干预,D组予含10%芪黄补肾泄浊方中剂量含药血清的高糖培养液(血清浓度10%)培养干预,E组予含10%芪黄补肾泄浊方高剂量含药血清的高糖培养液(血清浓度10%)培养干预,分别于培养48 h末收集细胞进行相关实验指标测定。免疫细胞化学检测方法分析Nrf2及HO-1的表达;运用Western Blot的方法从蛋白质水平观察芪黄补肾泄浊方对HMC Nrf2、HO-1蛋白表达的影响。Real-time PCR定量分析的方法在基因水平探究芪黄补肾泄浊方对HMC中HO-1mRNA表达水平的影响。结果:各组细胞培养48 h末免疫细胞化学法检测结果显示:B组细胞内Nrf2、HO-1的表达显示较A组减少,与B组比较,各药物血清组(C组、D组及E组)细胞内Nrf2、HO-1的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示:与A组比较,Nrf2、HO-1在B组细胞内的表达减少,C组、D组及E组与B组比较,细胞内Nrf2、HO-1的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR研究结果显示,各组细胞HO-1mRNA在正常对照组可有少量表达,48 h末高糖组较对照组表达减少,不同剂量芪黄补肾泄浊方药物血清刺激后表达增加,且以中剂量组和高剂量组表达增加更明显(P<0.05)。结论:芪黄补肾泄浊方对高糖培养下HMC氧化应激损伤有改善作用,其作用机制可能是通过激活Nrf2/HO-1信号通路实现的。

• 出版日期2020
• 单位黑龙江中医药大学