牛分枝杆菌HBHA-HSP65融合黏附素蛋白对小鼠的免疫保护力

作者：赵子惠; 崔光亚; 温峰琴; 曾巧英

来源：中国兽医科学, 2016, (06): 737-742.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.06.011

• 牛分枝杆菌
• HBHA-HSP65
• 疫苗
• 保护力 Mycobacterium bovis
• HBHA-HSP65
• vaccine
• protective efficacy

本研究以牛分枝杆菌valleeⅢ菌株的基因组DNA为模板,PCR扩增hbha和hsp65基因,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得融合基因hbha-hsp65,构建重组表达质粒p ET-hsp65、p ET-hbha、p ET-hsp65-hbha,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。表达蛋白纯化后与等体积的弗氏不完全佐剂混合,制备成浓度为150 g/m L的HBHA-HSP65亚单位疫苗。用其免疫BALB/c小鼠,评价其免疫保护效力。结果显示,表达蛋白的分子质量分别为65、28、95 ku,主要以可溶状态存在;ELISA测定的HBHA-HSP65的血清抗体效价达1∶16 000,显...

• 出版日期2016
• 单位甘肃农业大学