摘要

目的:从基因和蛋白水平探讨冬虫夏草菌粉提取液调节哮喘缓解期儿童体内T辅助淋巴细胞(T helperlymphocyte,Th)失衡及减轻炎症反应的机制,为冬虫夏草应用于哮喘缓解期提供理论依据。方法:采集20例哮喘缓解期儿童外周血3 mL,用Ficoll法分离出外周血单核细胞(peripheral bloodmononuclear cell,PBMC)。每份血样分为空白组,低、高剂量冬虫夏草菌粉提取液(10、20μg/mL)组。细胞培养箱中37℃、5%CO_2培养48 h后,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测PBMCγ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-10、T细胞表达的T盒(T-box expressed in T cells,T-bet)、GATA连接蛋白3(GATA-binding protein-3,GATA-3)、叉头状转录因子3(forkhead/winged-helix transcription factor-3,Foxp3)mRNA的表达,利用酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4及IL-10含量。结果:3组PBMC IFN-γmRNA的表达比较,差异无统计学意义;高剂量和低剂量冬虫夏草菌粉提取液组IL-4 mRNA的表达明显低于空白组(P=0.014,P=0.011);高剂量冬虫夏草菌粉提取液组IL-10 mRNA的表达高于空白组(P=0.034);3组IFN-γmRNA/IL-4 mRNA比值比较,差异无统计学意义。高剂量冬虫夏草菌粉提取液组细胞培养上清中IL-4含量低于空白组(P=0.018),IL-10含量及IFN-γ/IL-4比值均高于空白组(P=0.011,P=0.045);3组IFNγ含量比较,差异无统计学意义。高剂量和低剂量冬虫夏草菌粉提取液组PBMC T-bet/GATA-3比值及Foxp3 mRNA的表达均高于空白组(P=0.001,P=0.015);高剂量冬虫夏草菌粉提取液组GATA-3 mRNA的表达明显低于空白组(P=0.028);3组T-bet mRNA的表达比较差异无统计学意义。结论:冬虫夏草菌粉提取液可下调PBMC中GATA-3 mRNA的表达和上调Foxp3 mRNA的表达,增加IL-10的含量,以此减轻炎症反应。