Smad4诱导大规模染色质伸展结构域定位

作者：严景华; 方言; 吕秋军; 黄翠芬; 杨晓; 叶棋浓

来源：军事医学科学院院刊, 2004, (05): 410-413.

• Smad4
• 大规模染色质伸展
• 结构域
• 定位

目的 :了解Smad4能否调节大规模染色质结构改变并对其功能区域进行定位。方法 :将Smad4及其缺失突变体与 pRC lac载体上lac的阻遏物融合并在AO3 1细胞中表达。该细胞株由CHO细胞衍变而来 ,整合有 2 5 6个拷贝串联排列的lac操纵基因。在lac操纵子基因上游含有DHFR基因 ,可用甲氨蝶呤 (MTX)进行基因共扩增。在细胞中lac阻遏物识别和结合lac操纵子基因。用抗lac阻遏物抗体进行免疫组化试验 ,荧光显微镜下观察染色质结构的改变。结果 :野生型Smad4 (1～ 5 5 2aa)有一定的诱导染色质伸展能力 ,且不依赖于TGF β。N端区域 (1～ 15 0aa)、中间连接区域 (130～ 32 5aa)没有诱导大规模染色质伸展活性。C端区域 (2 6 0～ 5 5 2aa)有一定的诱导染色质伸展能力 ,而C端缺失 38个氨基酸残基的区域 (2 6 0～ 5 14aa)能强烈地诱导大规模染色质伸展。结论 :Smad4诱导大规模染色质伸展结构域位于 2 6 0～ 5 14位氨基酸之间 ,C端 38个氨基酸对Smad4诱导大规模染色质伸展有抑制作用。对Smad4诱导大规模染色质伸展活性特性的研究为揭示Smad4在肿瘤发生发展中的作用机制提供了新的途径。

• 出版日期2004
• 单位生命科学学院; 安徽农业大学; 军事医学科学院; 放射医学研究所