抗凋亡基因bcl-2转染哺乳动物细胞的研究

作者：何庆; 苏京; 刘铭; 王保平; 王晶; 陈克勤; 尹潍

来源：天津医药, 2006, 34(02): 105-107.

DOI：10.3969/j.issn.0253-9896.2006.02.012

• 基因,bcl-2
• 质粒基因
• DNA,重组
• 转染
• 免疫印迹法

目的:构建抗凋亡基因bcl-2的哺乳动物细胞表达型质粒并转染哺乳动物细胞293T细胞。方法:利用基因重组技术,将bcl-2全编码cDNA序列,导入pCMV-Tag1表达型质粒;应用磷酸钙共沉淀技术,将其转染293T细胞;并利用免疫沉淀和Westernblotting技术检测Bcl-2融合蛋白的表达。结果:bcl-2全编码cDNA序列成功导入pCMV-Tag1表达型质粒;在转染后的293T细胞成功地检测出bcl-2融合蛋白的表达,融合蛋白大小与预期完全一致。结论:该表达型质粒可以成功转染哺乳动物细胞,为对胰岛细胞的转染奠定了基础。

• 出版日期2006
• 单位天津医科大学总医院