大鼠肝脏F蛋白基因的克隆和表达

作者：刘树业; 俞新大; 宋春娟; **东; 石欣荣; 张琚

来源：同济大学学报(医学版), 2007, (01): 10-14.

• 肝脏
• F抗原
• 大肠杆菌
• 基因克隆
• 蛋白表达
• 大鼠 liver
• F-protein
• E.coli
• gene-cloning
• protein-expression
• rat

目的获得大鼠肝脏F蛋白基因克隆(F-protein’s cDNA);利用原核(大肠杆菌)表达系统表达大鼠肝脏F蛋白。方法提取大鼠肝脏总RNA,对其进行反转录和PCR(RT-PCR)扩增出目的基因(F-protein’s cDNA),然后将其与pUCm-T载体进行连接获得克隆质粒pUCm-T-F并转化到大肠杆菌DH5α中;将测序结果正确的克隆片断重新与表达载体pET-15b连接,获得F抗原表达质粒pET15b-F并将其转化到表达菌株BL21(DE3)pLysS中,用1mmol/L IPTG诱导其表达。结果RT-PCR扩增出的目的基因(F-protein’s cDNA),经测序证明与Gene-ba...

• 出版日期2007
• 单位天津市第三中心医院; 南开大学