弓形虫H4和Rab2基因真核表达载体的构建及其对N2a细胞凋亡和自噬的影响

作者：李贵峰; 孟婷婷; 杨子鹏; 王亚培; 袁子国^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(05): 580-588.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0062

• H4
• Rab2
• 雷帕霉素
• 细胞凋亡
• 自噬

本研究旨在探索弓形虫Rab2和H 4基因在神经细胞凋亡和自噬过程中的作用,并进一步研究雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对其的影响。本试验以弓形虫M e49虫株c DN A为模板,扩增H4和Rab2基因,并构建到真核表达载体pcDNA3.1 (+)上,转染小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a),同时设置RAPA给药组,检测目的基因及凋亡和自噬相关蛋白的表达情况。结果显示,重组质粒成功构建,弓形虫Rab2和H4基因在N2a细胞中表达,导致细胞凋亡相关蛋白Bcl-2下调和细胞自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ上调,但在RAPA组,Bcl-2却有上调趋势。此外还发现H4基因对于Rab2表达有促进作用。结果表明,H4和Rab2的表达可以促进N2a细胞的凋亡和自噬,而RAPA具有抑制细胞凋亡的作用,从而保护神经系统,这为弓形虫病的预防治疗提供了新思路。

• 出版日期2019
• 单位华南农业大学