埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基融合蛋白的真核表达与纯化

作者：王中一; 李佳明; 付莹莹; 郭振东; 陆兵; 钱军^*; 刘林娜^*

来源：吉林农业大学学报, 2019, 41(01): 92-96.

DOI：10.13327/j.jjlau.2018.3987

• 埃博拉病毒病
• 糖蛋白
• 真核表达
• Protein A亲和层析

埃博拉病毒糖蛋白与病毒黏附、入侵宿主细胞等过程密切相关,为了更好地研究该糖蛋白与宿主细胞的相互作用,拟通过哺乳动物细胞表达系统,构建GP1亚基Fc标签融合蛋白。经鉴定,成功构建了埃博拉病毒糖蛋白GP1亚基的真核表达载体pFUSE-GP1-hIgG1-Fc2,并利用该载体及293T细胞构建了表达GP1亚基融合蛋白的哺乳动物细胞系。该融合蛋白N端带有IL2分泌信号肽,C端带有人IgG1-Fc2标签,可在293T细胞以分泌表达的方式存在于细胞培养上清中,而后利用Protein A亲和层析进行融合蛋白纯化。经Western Blots鉴定,成功制备GP1-Fc融合蛋白。这不仅为埃博拉病毒糖蛋白的研究提供了技术支撑,也为其他种类蛋白的哺乳动物细胞真核表达纯化提供了新思路。

• 出版日期2019
• 单位吉林农业大学