超声辅助提取-反相高效液相色谱法测定虾中三磷酸腺苷及其关联产物的含量

作者：周漪波; 王和平^*; 胡雪玉; 邓远强; 阮奇珺; 张飞

来源：理化检验. B, 化学分册, 2022, 58(10): 1165-1169.

• 虾
• 三磷酸腺苷
• 超声辅助提取
• 反相高效液相色谱法
• K值

提出了超声辅助提取-反相高效液相色谱法测定虾中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、腺苷酸(AMP)、肌苷酸(IMP)、肌苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx)含量的方法，并研究了贮藏条件对K值的影响。称取2.0 g粉碎后的虾肉，加入10%(体积分数)高氯酸溶液20 mL,在冰水浴中均质1 min,超声提取5 min,于4℃离心2 min。用5%(体积分数)高氯酸溶液20 mL重复上述操作，合并两次上清液，用水定容至50 mL。分取5 mL,用5.0 mol·L-1和2.5 mol·L-1氢氧化钠溶液调节溶液酸度至pH 6.0～6.4后，再用0.048 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH 5.7)定容至10 mL。以Ultimate? XB-C4反相色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)为固定相，以不同体积比的0.048 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH 5.7)-甲醇混合溶液为流动相进行梯度洗脱，外标法定量。结果显示：ATP、ADP、IMP标准曲线的线性范围为1.250×10-1～1.000×102mg·L-1,AMP、HxR、Hx标准曲线的线性范围为6.250×10-2～5.000×10 mg·L-1,检出限为0.65～2.2 mg·kg-1;混合标准溶液和供试品溶液中6种目标物测定值的相对标准偏差(n=6)为0.28%～8.7%;对实际样品进行加标回收试验，回收率为75.3%～114%。方法用于测定不同贮藏温度和贮藏时间下虾样品中ATP、ADP、AMP、IMP、HxR、Hx的含量，结果表明随着贮藏时间的延长，K值逐渐增大；并且贮藏时间一定时，贮藏温度越低，K值增大速率越慢，说明低温有利于虾的保鲜。

• 出版日期2022
• 单位中国广州分析测试中心; 广东省科学院