牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立

作者：范晴; 谢芝勋; 刘加波; 庞耀珊; 邓显文; 谢志勤; 谢丽基; 彭宜

来源：中国兽医学报, 2011, (10): 1414-1418.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2011.10.016

• 牛病毒性腹泻病毒
• 牛轮状病毒
• TaqMan二重荧光RT-PCR BVDV
• BRV
• TaqMan-based duplex real-time RT-PCR

根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′端非编码区和牛轮状病毒(BRV)VP6基因序列,设计特异性引物和探针。通过对引物和探针浓度、Mg2 浓度、dNTP浓度和Taq酶用量以及反应条件等因素的优化筛选,建立了能同时鉴别BVDV和BRV的二重荧光RT-PCR方法。该方法特异性好,与其他病原如CSFV、MB和IBRV不发生交叉反应;敏感性高,能够检测100个BVDV RNA和100个BRV RNA;稳定性好,批内重复和批间重复变异系数小;干扰性试验表明该方法能同时检测2个模板的不同浓度组合。本研究建立的二重荧光RT-PCR方法可用于BVDV和BRV检测,具有特异、敏感、快速、稳定等优点,是BVDV和B...

• 出版日期2011
• 单位广西壮族自治区兽医研究所