牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0的构建与免疫原性分析

作者：蒋禄峰; 赵月兰; 李苏楠; 吉星煜; 张晶; 张月; 王建永; 包永占; 秦建华

来源：中国兽医学报, 2014, (11): 1743-1747.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2014.11.009

• BVDV
• E0基因
• pMG36e载体
• 大肠杆菌
• 原核表达
• 免疫原性 bovine viral diarrhea virus(BVDV)
• E0genes
• pMG36evectors
• expression
• immunogenicity

利用SacⅠ、HindⅢ限制性内切酶分别对pMG36e与pMD19-T-E0进行双酶切,将目的基因E0整合入穿梭表达载体pMG36e,构建牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0。提取重组质粒pMG36e-E0,进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒pMG36e-E0转化到大肠杆菌DH5α中进行表达,对表达产物进行SDSPAGE和Western-blotting鉴定。用表达的E0蛋白二次免疫家兔,间接ELISA法检测其血清抗体水平。结果,重组质粒经双酶切得到大小分别约为3 600、691bp的2个片段,PCR扩增出691bp的片段,双酶切与PCR鉴定结果表明目的基因E0正确插...

• 出版日期2014
• 单位河北农业大学; 吉林大学