摘要

从发芽绿豆中提取胆碱酯酶,并测定了有机磷农药毒死蜱对该酶活性的抑制作用.以吸光度为指标,研究了酶液浓度、反应时间、缓冲溶液pH值对胆碱酯酶催化α-乙酸萘酯水解反应的影响,优化了反应条件.结果表明,胆碱酯酶催化α-乙酸萘酯水解反应的最佳条件为:在0.2 mol/L pH6.7磷酸缓冲体系中,粗酶液添加量为0.52 mg(蛋白质含量)、40℃下催化分解5 min,显色10 min,在520 nm处有最大吸收值.毒死蜱对酯酶酶促反应抑制在2 min后稳定,建立了酶抑制反应的标准曲线和检测毒死蜱残留量的方法,方法灵敏度为0.006 7μg/mL,最小检出浓度为0.08μg/mL.