兔促性腺激素抑制激素受体基因NPFFR1的克隆及其在HPT轴的表达分析

作者：桑雷; 高承芳; 孙世坤; 王锦祥; 陈冬金; 谢喜平^*

来源：农业生物技术学报, 2023, 1-9.

• 兔
• 促性腺激素抑制激素(GnIH)
• 神经肽FF受体1 (NPFFR1)
• 克隆
• 基因表达

神经肽FF受体1 (neuropeptide FF receptor 1, NPFFR1)是促性腺激素抑制激素(gonadotropininhibitory hormone, GnIH)的主要受体，在调控动物生殖生理方面起着重要作用。为了解NPFFR1基因的功能，本研究以闽西南黑兔(Oryctolagus cuniculus)为研究对象，采用cDNA末端快速克隆(rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术克隆了NPFFR1基因(GenBank No. OP791886)，并对其进行了生物信息学和时空表达谱分析；此外，公兔腹腔注射0、0.5、5和50μg GnIH多肽，利用q PCR方法检测下丘脑-垂体-睾丸(hypothalamic-pituitary-testicular, HPT)轴中NPFFR1基因的表达水平。生物信息学分析表明，兔NPFFR1全长3 712 bp，编码432个氨基酸；其翻译的蛋白由α螺旋、无规卷曲和β折叠组成，是镶嵌于质膜的7次跨膜蛋白，与高原鼠兔(Ochotona curzoniae)和北美鼠兔(Ochotona princeps) NPFFR1高度同源。qPCR结果表明，NPFFR1基因在HPT轴中均有表达，在下丘脑的表达量显著高于垂体和睾丸(P<0.05)。出生后，90日龄兔下丘脑NPFFR1基因表达量显著低于11、30、60和150日龄(P<0.05),30和120日龄兔垂体NPFFR1基因表达量显著低于11和90日龄(P<0.05),30日龄兔睾丸NPFFR1基因表达量显著低于11和90日龄。兔腹腔注射5～50μg GnIH多肽后，下丘脑NPFFR1基因表达量呈现剂量依赖性增加；50μg剂量组睾丸NPFFR1基因表达量显著大于5μg剂量组(P<0.05)；注射任何剂量GnIH多肽都未引起垂体NPFFR1表达量发生改变。本研究为深入探讨兔NPFFR1在生殖生理方面的作用机制提供基础资料。

• 出版日期2023
• 单位福建省农业科学院