南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819遗传操作系统的建立

作者：刘增智; 李通; 刘晶; 姚婷婷; 张慧; 夏娟; 李花月; 车茜; 李文利

来源：中国海洋药物, 2016, 35(04): 53-59.

DOI：10.13400/j.cnki.cjmd.2016.04.010

• Streptomyces sp.OUC6819
• PKSs
• PCR-targeting
• 接合转移
• 基因敲除

目的建立南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819菌株的遗传转化系统,通过基因阻断方法来研究次级代谢产物的生物合成途径。方法分别以整合型载体pSET152和用于同源重组的、包含可能参与大环多烯类化合物生物合成的DNA片段的非复制型cosmid质粒,通过大肠杆菌—链霉菌属间接合转移导入Streptomyces sp.OUC6819之中。结果通过在接合转移过程中对菌丝体进行超声破碎,成功获得了正确的接合子。采用PCR方法验证了pSET152的导入和目标基因orf1的阻断,进一步对突变株的发酵产物进行了HPLC分析,结果显示突变株丧失了合成大环多烯类化合物的能力。结论成功建立了基于菌丝体超声破碎的海洋链霉菌遗传转化系统,为对其它基因进行遗传学操作奠定了基础,也为其它不便进行遗传操作的链霉菌提供了参考。

• 出版日期2016
• 单位中国海洋大学; 医药学院