自噬对金雀异黄酮抑制宫颈癌细胞增殖的影响

作者:任晓霞; 杨艳梅; 王虹; 马敬全; 刘倩; 邵嘉艺; 韩腾; 唐丽萍
来源:医学研究生学报, 2017, 30(06): 579-583.
DOI:10.16571/j.cnki.1008-8199.2017.06.005

摘要

目的金雀异黄酮对多种肿瘤有抑制作用。文中研究金雀异黄酮对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用和对自噬的诱导,以及自噬在此过程中的作用机制。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,将其分为对照组、金雀异黄酮组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+金雀异黄酮组,对照组只加培养液,金雀异黄酮组用(25、50、100μmol/L)金雀异黄酮处理,3-MA+金雀异黄酮组先用5 mmol/L 3-MA预处理1 h后加入100μmol/L金雀异黄酮,采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率的变化;透射电镜观察细胞自噬超微结构的改变;Western blot检测自噬相关蛋白P62及Beclin-1的表达情况;免疫荧光法检测LC3A/B的表达,分析金雀异黄酮对细胞自噬水平的影响。结果与对照组Hela细胞增殖抑制率(0)相比,25、50、100μmol/L金雀异黄酮处理后,Hela细胞增殖的抑制率(20.9%±1.3%,33.5%±1.6%,46.5%±3.2%)逐渐增高(P<0.01)。使用不同浓度(25、50、100μmol/L)金雀异黄酮处理Hela细胞48 h后,随着金雀异黄酮浓度增高Beclin-1表达逐渐增强,P62的表达逐渐降低。激光共聚焦显微镜下观察可见,100μmol/L金雀异黄酮处理组He La细胞细胞质中可见到大量LC3A/B绿色荧光分布,且荧光强度较强。金雀异黄酮(100μmol/L)处理48 h后细胞质中可见大量空泡状结构及包含部分细胞质成分形成双层膜结构的自噬体。金雀异黄酮组Hela细胞的增殖抑制率较3-MA+金雀异黄酮组低[(46.5±3.2)%vs(58.2±2.2)%,P<0.01]。结论金雀异黄酮可抑制Hela细胞增殖,并诱导自噬增强。

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