摘要

目的研究高浓度唑来膦酸对体外分离的健康人牙周膜干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响。方法体外分离培养健康人牙周膜干细胞,用不同浓度的唑来膦酸(5、10μmol/L)处理,不加药组为空白对照。以CCK8检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡,ALP、茜素红染色及半定量分析检测细胞体外成骨分化,荧光定量PCR检测成骨标志物Ⅰ型胶原(COL1A1)和骨钙素(OCN)基因的表达,免疫荧光检测OCN和COL1A1蛋白的表达。结果唑来膦酸可呈剂量依赖性抑制人牙周膜干细胞增殖;唑来膦酸处理后,人牙周膜干细胞的凋亡率高于对照组,且随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐上升(P<0.05);ALP和茜素红染色结果表示唑来膦酸用药组细胞的体外成骨分化能力较对照组下降(P<0.05);荧光定量RT-PCR和免疫荧光结果提示,药物处理后细胞的成骨相关基因OCN和COL1A1的基因表达和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论高浓度唑来膦酸显著抑制人牙周膜干细胞的增殖及体外成骨分化,并诱导其凋亡。

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