抗人Flt-1单克隆抗体的制备和活性鉴定

作者：谢印良; 马莉; 秦立; 刘鹏; 曹善楠; 朱海燕; 熊冬生; 许元富

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, 28(05): 524-528.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006417

• 人血管内皮生长因子受体-1
• 单克隆抗体
• 血管新生
• 细胞因子

目的:制备小鼠抗人血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)的单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白为抗原,通过经典的杂交瘤制备和活性筛选方法建立能稳定分泌抗Flt-1蛋白的mAb杂交瘤细胞株。结果:经传统的小鼠腹水型抗体的制备和纯化方法获得了高纯度的抗人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的mAb。ELISA方法测定出该抗体的免疫球蛋白亚型为IgG1,轻链为κ链。West-ern blot结果显示该抗体能特异性地识别重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白,FACS结果表明该抗体能结合到Flt-1阳性的脐静脉内皮细胞和K562/A02细胞表面,并呈现出抗体浓度依赖性。结论:成功建立了1株能够稳定分泌抗重组人Flt-1胞外Ⅲ区蛋白的mAb细胞株XA12,为今后进一步开展Flt-1及其胞外Ⅲ区蛋白的生物学功能研究以及基因工程抗体研究奠定了基础。

• 出版日期2012
• 单位北京协和医学院; 实验血液学国家重点实验室; 中国医学科学院血液学研究所; 解放军第302医院