高表达CXCR7对乳腺癌细胞增殖和迁移影响

作者：李雨静; 黄闽辉; 陈冰霞; 马伟峰

来源：中华肿瘤防治杂志, 2018, 25(12): 842-848.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2018.12.003

• 趋化因子受体
• 乳腺癌细胞
• 增殖
• 迁移

目的趋化因子受体7(CXC chemokine receptor 7,CXCR7)与乳腺癌的发生发展密切相关,但CXCR7对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响并不十分清楚。本研究旨在探讨CXCR7对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法 PCR扩增CXCR7基因表达序列,构建重组质粒CXCR7/pMSCV-neo,与包装质粒PIK共转染HEK 293T细胞包装慢病毒,感染MCF-7细胞构建CXCR7高表达的MCF-7细胞。RT-qPCR及蛋白质印迹法检测感染后细胞株CXCR7基因和蛋白表达水平,流式细胞术检测MCF-7细胞表面受体CXCR7表达情况。MTT法检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果菌液PCR、双酶切及测序结果证实重组质粒CXCR7/pMSCV-neo构建成功,转染HEK293T细胞获得高滴度的慢病毒。RT-qPCR和蛋白质印迹法检测结果表明,相对于MCF-7Vector细胞,MCF-7CXCR7细胞中CXCR7基因和蛋白的表达量分别增加约7.5和10倍。流式细胞术检测结果表明,转染后MCF-7细胞的CXCR7阳性率明显提高,t=22.946,P<0.001。而MCF-7Vector细胞与未转染慢病毒的MCF-7细胞表面受体CXCR7的表达量,差异无统计学意义,t=0.386,P=0.706。MTT实验结果显示,相对于MCF-7和MCF-7Vector细胞,MCF-7CXCR7细胞在24、48、72、96h的增殖率显著升高(n=5,P<0.05),表明MCF-7CXCR7细胞增殖速度明显高于MCF-7和MCF-7Vector细胞,而MCF-7和MCF-7Vector组各时间点细胞增殖率比较,差异无统计学意义,P>0.05。细胞划痕实验结果显示,相对于MCF-7和MCF-7Vector,MCF-7CXCR7细胞在24、48h的迁移率明显提高。结论成功构建CXCR7慢病毒表达载体,获得CXCR7受体高表达的乳腺癌细胞,同时证实CXCR7可促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力。

• 出版日期2018
• 单位南方医科大学; 公共卫生学院