PAP基因cDNA克隆及烟草转基因研究

作者：王燕萍; 曹俊剑; 刘海礁; 崔红

来源：河南农业大学学报, 2006, (02): 130-132+141.

• 烟草
• 商陆抗病毒蛋白(PAP)
• cDNA克隆
• 基因转导
• 烟草花叶病

以美洲商陆(Phytolacca americanaL.)为材料,利用RT-PCR方法克隆商陆抗病毒蛋白(PAP)的cDNA,并构建双元植物表达载体pBinARpap.用捕获该质粒的根癌农杆菌菌株LBA4404与烟草叶片外植体共培养,并在附加30 mg.L-1Kan的MS+0.1 mg.L-1IAA+1.5 mg.L-1BA的培养基上诱导植株分化,再生芽在附加30 mg.L-1Kan的MS培养基上生根,实现再生植株.Kan阳性植株经PCR-Sourthern检测筛选,得到PCR阳性植株,证明异源PAP基因在烟草基因组中的整合;经过RT-PCR检测,证明PAP基因在RNA转录水平上有表达;攻毒试验表明,转基因烟草植株对供试病毒TMV具有明显抗性.

• 出版日期2006-4-30
• 单位河南农业大学