大豆过氧化氢酶同源基因在大肠杆菌中融合表达

作者：陈金峰; 胡斌杰; 王宫南

来源：中国油料作物学报, 2013, (04): 384-388.

• 大豆
• 过氧化氢酶
• 大肠杆菌
• 表达 Soybean
• Catalase
• Escherichia coli
• Expression

利用RT-PCR技术获得大豆的过氧化氢酶基因家族的GmCAT3、GmCAT4、GmCAT5的cDNA片段,进化树分析表明GmCAT3和GmCAT1/2,GmCAT5和豌豆PsCAT、豇豆VrCAT的亲缘关系较近;将3个目的基因克隆到pMD19-T载体上,再连接到pET28a表达载体上,获得重组载体pET28a-GmCAT3、pET28a-GmCAT4和pET28a-GmCAT5,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析,在20℃条件下,0.1mmol/L的IPTG诱导12h表达量最佳,诱导的目的蛋白在60kD处以包涵体的形式存在,获得重组蛋白分别占总蛋白的35....

• 出版日期2013
• 单位开封大学