关于定量PCR技术中模板使用浓度的研究

作者：周婷婷; 杨延磊; 筎金; 李力燕

来源：昆明医学院学报, 2013, (03): 15-17.

• 定量PCR
• 琼脂糖凝胶电泳
• mRNA定量 Quantitative PCR
• Agarose gel electrophoresis
• mRNA quantification

目的研究定量PCR模板使用浓度对产物量的影响,对如何改善定量PCR技术进行一些探讨.方法分别用1×浓度和1/10×浓度逆转录产物(cDNA)进行递增量的梯度PCR反应(0.5μL、1μL、2μL、4μL),观察其不同量之间变化的灵敏性;进一步增大样本量,来观察这两个浓度级别分辨两倍量差距(1μL和2μL)的能力.结果在梯度实验中,1/10×浓度的模板表现出了明显的线性关系(R2=0.9105),即产物量随模板使用量的增加而增加,而1X浓度的模板却没有表现出来(R2=0.2488).此外,1/10×浓度的模板有效的区分出了两倍量的差距(1μL组和2μL组之间,t=3.329,P<0.05)而1x...

• 出版日期2013
• 单位昆明医科大学