大鼠胰岛素Ⅱ基因启动子克隆与功能验证

作者：韦玲静; 黄玥萌; 严雪瑜; 蒋钦杨; 兰干球; 郭亚芬

来源：南方农业学报, 2014, 45(10): 1861-1865.

DOI：10.3969/j:issn.2095-1191.2014.10.1861

• 大鼠
• 胰岛素Ⅱ基因启动子
• 克隆
• 功能验证
• 真核表达载体 rat
• insulin 2 gene promoter
• clone
• functional verification
• eukaryotic expression vector

【目的】克隆大鼠胰岛素II基因启动子(RIP2)序列并对其功能进行验证,为培育胰岛特异性表达外源基因的转基因动物奠定基础。【方法】根据Gen Bank中已发表的RIP2序列(J00748.1)设计引物,以大鼠基因组DNA为模板,PCR扩增RIP2序列,连接p MD18-T载体后用Hind III和Bam H I进行双酶切,回收RIP2片段并连接至不含启动子的p EGFP-1载体上构建真核表达载体p EGFP-1-RIP2。重组质粒转染PK15细胞,24 h后观察细胞荧光蛋白表达情况。【结果】克隆获得的RIP2序列与参考序列(J00748.1)的同源性为99.9%,存在3处碱基差异,即从起始密码...

• 出版日期2014
• 单位广西大学