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摘要
目的 探究白皮杉醇（PIC）调控微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)/RUNT相关转录因子3(RUNX3)轴对宫颈癌（CC）细胞迁移及侵袭的影响。方法 使用不同浓度PIC(0、20、40、80和160μmol/L)培养液处理人CC Hela细胞，通过CCK-8法检测PIC对细胞增殖活力的影响，以确定PIC最佳使用浓度。将Hela细胞分为Control组、PIC组、PIC+NC mimics组、PIC+miR-106b-5p mimics组、NC inhibitor组、miR-106b-5p inhibitor组、miR-106b-5p inhibitor+siRNA组及miR-106b-5p inhibitor+si-RUNX3组。实时荧光定量PCR检测各组Hela细胞miR-106b-5p表达水平；Transwell法检测各组Hela细胞迁移及侵袭能力；Western blot法检测各组Hela细胞中RUNX3、基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP9蛋白表达水平；双萤光素酶报告基因实验检测miR-106b-5p与RUNX3靶向关系。结果 Hela细胞增殖活力随着PIC处理浓度的增高而呈现降低趋势（P<0.05），其中80μmol/L PIC对Hela细胞的抑制作用接近半数抑制浓度（IC50），故选择80μmol/L为后续研究的PIC浓度。与Control组相比，PIC组miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平均降低，迁移和侵袭细胞数量减少，RUNX3表达水平增加（P<0.05）；与PIC+NC mimics组相比，PIC+miR-106b-5p mimics组miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平增加，迁移和侵袭细胞数量增多，RUNX3表达水平降低（P<0.05）。双萤光素酶报告基因实验证实RUNX3为miR-106b-5p的靶基因。与NC inhibitor组相比，miR-106b-5p inhibitor组RUNX3表达水平增加，miR-106b-5p、MMP2与MMP9表达水平降低，迁移和侵袭细胞数量减少（P<0.05）；与miR-106b-5p inhibitor+si-RNA组相比，miR-106b-5p inhibitor+si-RUNX3组RUNX3表达水平降低，miR-106b-5p、MMP2和MMP9表达水平增加，迁移和侵袭细胞数量增多（P<0.05）。结论 PIC通过抑制miR-106b-5p表达、促进RUNX3表达来抑制CC细胞迁移及侵袭。
- 出版日期2023
- 单位石家庄市第四医院
