PDGF-BB诱导肺动脉平滑肌细胞表型转换时细胞骨架的变化

摘要

目的研究血小板衍生生长因子(PDGF-BB)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)表型转换时细胞骨架构象的改变,探讨PASMCs表型转换的机制。方法原代培养并鉴定SD大鼠PASMCs,将PASMCs分为对照组(细胞不加诱导剂培养24h)、实验组(细胞用PDGF-BB 10ng/mL诱导培养24h);实时荧光定量PCR(RTqPCR)及Western blot检测细胞表型转化标志基因[α-肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α蛋白(SM22α)]mRNA及相关蛋白的表达;免疫荧光法检测细胞骨架微丝F-actin及微管α-tubulin、β-tubulin的构象;CCK-8法检测细胞增殖能力及划痕实验观察细胞迁移能力。结果与对照组相比,PDGF-BB下调α-SMA及SM22α表达水平;细胞骨架荧光强度明显减弱,F-actin排列紊乱、边缘不规则、呈毛刺样,α-tubulin、β-tubulin形态模糊,表现为共定位;明显增强PASMCs增殖与迁移能力。结论 PDGF-BB可能通过影响细胞骨架构象诱导PASMCs表型转换,进而改变细胞增殖及迁移能力。

关键词