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摘要
背景:肝细胞移植对于晚期肝功能衰竭患者是一种非常有效的替代治疗方法,体外条件下扩增培养肝细胞具有非常重要的临床意义。目的:体外实验探讨人脐带间充质干细胞对原代小鼠肝细胞功能的调控作用。方法:实验分3组:①人脐带间充质干细胞与原代小鼠肝细胞非接触共培养(非接触共培养组);②人脐带间充质干细胞培养液上清与原代小鼠肝细胞共培养(上清组);③原代小鼠肝细胞用含体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养(常规培养组)。培养48,72,96 h,采用MTT法检测3组肝细胞增殖情况,吲哚菁绿检测肝细胞相关功能,ELISA法检测白蛋白及尿素分泌情况,RT-PCR检测肝细胞相关基因表达。该研究的实施符合喀什地区第一人民医院的相关伦理要求(伦理批件号:01号)。结果与结论:①与常规培养组相比,培养48,72,96 h时非接触共培养组和上清组都可以显著促进小鼠肝细胞增殖,差异有显著性意义(P <0.05);②与常规培养组相比,培养96 h时非接触共培养组和上清组都可以维持小鼠肝细胞的摄取功能活性,差异有显著性意义(P <0.05);③与常规培养组相比,在48 h和96 h时非接触共培养组和上清组小鼠肝细胞分泌白蛋白及尿素水平显著升高,差异有显著性意义(P <0.05);④与常规培养组相比,非接触共培养组和上清组HGF、b FGF以及ALB mRNA表达显著升高,差异有显著性意义(P <0.05);但细胞色素基因CYP2B9的表达在3组细胞内差异无显著性意义(P> 0.05);⑤结果表明,脐带间充质干细胞可通过旁分泌机制在体外维持原代小鼠肝细胞功能,并促进其增殖,是体外条件下人工扩增肝细胞的一种新的应用策略。
- 出版日期2019
