口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测

作者：付元芳; 卢曾军; 曹轶梅; 郭建宏; 张小丽; 田美娜; 刘在新; 才学鹏

来源：微生物学报, 2008, (06): 790-795.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2008.06.017

• 口蹄疫病毒
• 非结构蛋白
• 酶联免疫电转移印迹技术(EITB) Foot-and-Mouth Disease Virus (FMDV)
• non-structural protein (NSP)
• immunoelectro-transfer blot (EITB)

【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3...

• 出版日期2008
• 单位甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室