氨基免疫荧光探针在瓣膜交联度检测中的应用

作者：李梓; 张旭平; 焦海淼; 刘鲁祁

来源：山东大学学报(医学版), 2014, (12): 1-4+9.

• 人工生物瓣膜
• 交联度
• 羧基荧光素琥珀酰亚胺酯
• 免疫荧光探针 Bioprosthetic valve
• Degree of cross-linking
• Carboxyl fluorescein succinimide ester
• Immunofluorescence probe

目的利用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)能与氨基基团发生特异性不可逆结合,且在波长为488 nm的激发光下发出绿色荧光的特性,检测人工心脏瓣膜的交联程度。方法将去细胞的牛心包浸泡于0.5%的戊二醛溶液中进行交联处理,根据浸泡时间不同分为空白对照组、10 min组、30 min组和6 h组。各组分别制成冰冻切片,经CFSE溶液处理后,通过荧光显微镜观察每组切片的荧光强度,采用图像分析软件计算每组图像的平均荧光强度。同时,从戊二醛处理过的牛心包中提取蛋白质,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)检测各组牛心包的剩余蛋白含量,与氨基免疫荧光探针法进行比较。结果未交联的氨基数量随交联时间增加逐渐...

• 出版日期2014
• 单位山东省千佛山医院; 山东大学