口蹄疫病毒3A蛋白和FLAG标签的融合表达与血清学分析

作者:祁国财; 曹轶梅; 付元芳; 厍大亮; 况文东; 孙普; 卢曾军; 刘在新
来源:中国兽医科学, 2012, (07): 690-695.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2012.07.004

摘要

通过对比各短肽标签,选择由8个氨基酸组成的FLAG标签弥补口蹄疫疫苗毒株OZK 3A蛋白的93~102位10个氨基酸缺失,原核表达FLAG与3A的嵌合蛋白,并命名为3AF。同时也表达了OZK毒株原始3A蛋白。分别以3A和3AF蛋白作为免疫原免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,采用ELISA和Western-blot分析融合蛋白的血清学反应活性。结果表明,3A蛋白和3AF蛋白均能在大肠杆菌中有效表达,且主要以可溶性形式表达。纯化的3AF蛋白能与FLAG单抗特异性反应而未能诱导免疫小鼠产生针对该标签的抗体,体现了体外和体内的生物反应性差异。FLAG标签对3A蛋白的表达水平、表达形式等未产生显著影响...

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