禽网状内皮组织增生病病毒gp90基因在杆状病毒中的表达及其产物的活性分析

作者：高立; 祁小乐; 高玉龙; 高宏雷; 秦立廷; 邓小芸; 王笑梅

来源：中国兽医科学, 2009, (11): 973-977.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2009.11.008

• 禽网状内皮组织增生病病毒
• gp90基因
• sf9细胞
• 杆状病毒
• 生物活性 reticuloendotheliosis virus
• gp90 gene
• sf9 cells
• baculovirus
• reactionogenicity

以质粒pMD18T-env为模板,利用PCR技术扩增禽网状内皮组织增生病病毒的gp90基因,酶切、纯化后,克隆至载体pFastBacHTA中,构建了重组供体载体pFgp90,并将其转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,使gp90基因整合到Bacmid穿梭载体中,获得重组穿梭载体Bacmidgp90。通过脂质体介导将其转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacgp90。抗gp90蛋白小鼠超免疫血清介导的Western-blot分析和间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,gp90蛋白被正确表达,分子质量约为45 ku;gp90蛋白在变性和自然状态下均能够被识别,具有良好的生物活性。

• 出版日期2009
• 单位兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所