H9和H6亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

作者：李丹; 谢芝勋; 宋德贵; 李孟; 谢志勤; 罗思思; 谢丽基; 黄莉; 范晴; 黄娇玲

来源：中国畜牧兽医, 2016, 43(12): 3101-3106.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.12.003

• 禽流感病毒
• H9亚型
• H6亚型
• 二重RT-PCR

试验旨在建立可同时鉴别检测H9和H6亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的二重RT-PCR方法。根据GenBank中H9和H6亚型AIV的HA基因保守序列,分别设计2对特异性引物,优化引物浓度与退火温度等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H6亚型AIV的二重RT-PCR检测方法。用该法对H9和H6亚型AIV混合感染样品、H9亚型AIV单一感染样品和H6亚型AIV单一感染样品进行扩增,结果均得到对应的目的条带,而对其余亚型AIV及其他禽病病原体均未扩增出特异性条带。该法对H9和H6亚型AIV的检测下限均为5×104拷贝/μL。本研究建立的二重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、稳定性和重复性良好,可同时鉴别检测H9与H6两种亚型AIV,为H9与H6亚型AIV的监测提供技术支撑。

• 出版日期2016
• 单位生命科学学院; 广西师范大学; 广西壮族自治区兽医研究所