植物亚细胞定位载体卡盒pCEG的构建及验证

作者：朱丹; 王希; 朱延明; 陈超; 李勇; 柏锡; 才华; 纪巍

来源：东北农业大学学报, 2011, (04): 83-88.

DOI：10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2011.04.017

• 载体卡盒构建
• 亚细胞定位
• GFP
• 烟草 construction of vector box
• subcellular localization
• GFP
• tobacco

GFP基因被广泛地应用于植物转基因以及基因功能验证研究,然而构建与GFP融合的植物表达载体,常会因酶切位点难以选择,而使得载体构建过程复杂,周期长。以含GFP的质粒pCAMBIA-1302为基础,消除此质粒本身的多克隆位点(MCS),并在此质粒GFP基因序列前插入原核表达载体pET-32b的多克隆位点,构建了植物GFP亚细胞定位载体卡盒pCEG;采用农杆菌介导的转化方法,将此载体卡盒pCEG导入模式植物烟草叶片中进行瞬时表达,用激光共聚焦显微镜观察GFP蛋白的亚细胞定位情况,发现GFP蛋白均匀的在细胞质和细胞核中表达,证明此载体卡盒可用于植物基因的亚细胞定位分析,并为构建目的基因与GFP融合的...

• 出版日期2011
• 单位东北农业大学