人骨髓间充质干细胞培养上清在SH-SY5Y细胞氧化应激损伤修复中的作用及其机制

作者：蒲文星; 米旭光; 周阳; 汪文涛; 景猛; 孟繁凯^*

来源：中国生物制品学杂志, 2022, 35(04): 391-398.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003577

• 人骨髓间充质干细胞
• 1-甲基-4-苯基吡啶离子
• SH-SY5Y细胞
• 氧化应激
• 活性氧
• 细胞凋亡

目的 探讨人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs）培养上清（hBMSCs-Sup）在SH-SY5Y细胞氧化应激损伤修复中的作用及其机制。方法 将SH-SY5Y细胞分为4组：分别用含等容积磷酸盐缓冲液（对照组）、不同浓度1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-methyl-4-phenylpyridine ion,MPP+）(0.25、0.5、1、2、4 mmol/L)、0.25 mmol/L MPP++hBMSCs-Sup或0.25 mmol/L MPP++无外泌体的hBMSCs-Sup(hBMSCs-Supexo-)完全培养基培养不同时间（24、48和72 h），通过MTT法检测细胞活性，流式细胞术检测胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量及细胞凋亡率，Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 SH-SY5Y细胞的活性随着MPP+浓度的增加以及处理时间的延长逐渐下降。与对照组相比，MPP+组细胞存活率显著下降（P <0.001）,ROS含量和凋亡率显著升高（P <0.001），凋亡相关蛋白Bax表达显著增加（P <0.01），增殖相关蛋白P-Akt和抗凋亡相关蛋白Bcl-2表达显著减少（P <0.01）；与MPP+组相比，MPP++hBMSCs-Sup组细胞存活率显著升高（P <0.001）,ROS含量和凋亡率显著降低（P <0.001和<0.01）,Bax蛋白表达显著下降（P <0.05）,P-Akt和Bcl-2蛋白表达显著增加（P <0.05）;MPP++hBMSCs-Supexo-组细胞存活率和ROS含量与单用MPP+组之间差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 hBMSCsSup通过其外泌体组分降低细胞内的ROS含量，激活AKT途径，恢复MPP+下调的SH-SY5Y细胞存活率和MPP+提高的SH-SY5Y细胞凋亡率。

• 出版日期2022
• 单位吉林省人民医院; 长春中医药大学