禽网状内皮组织增生症病毒MD-2株感染性克隆的构建与突变分析

作者：黄小洁; 孔冬妮; 刘丹; 陈晓春; 杨飞; 侯力丹; 李俊平^*

来源：中国家禽, 2020, 42(01): 38-43.

DOI：10.16372/j.issn.1004-6364.2020.01.008

• 禽网状内皮组织增生症病毒
• 感染性克隆
• 构建
• 突变

为构建禽网状内皮组织增生症病毒(REV)MD-2株的感染性克隆,将MD-2株的前病毒基因组全长克隆至pMD18-T Simple载体中构建MD-2全长质粒,经转染CEF细胞后进行病毒拯救及鉴定,并对拯救病毒进行了生物学特性研究。结果表明,成功构建了MD-2全长质粒,拯救病毒感染CEF细胞后用间接免疫荧光试验检测到病毒抗原;拯救病毒的生长特性与亲本病毒相比无明显差异。随后对env基因进行了多个位点的定点突变,并拯救出相应的突变株,结果显示env基因第1433位碱基突变后不能拯救出病毒,推断1433位的突变为致死性突变。MD-2株感染性克隆的构建和病毒拯救的研究为继续研究REV基因和蛋白功能提供了技术支持。

• 出版日期2020
• 单位中国兽医药品监察所