犬新孢子虫MAG1与IFN-γ融合基因重组质粒的构建及原核共表达

作者：焦石; 贾立军; 张立霞; 钱年超; 刘明明; 黄国明; 张守发

来源：中国兽医学报, 2013, (03): 386-388+408.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.03.021

• 犬新孢子虫
• MAG1
• IFN-γ
• 原核共表达 Neospora caninum
• MAG1 gene
• IFN-γ gene
• prokaryotic co-expression

根据发表的犬新孢子虫MAG1基因序列(EF580924.1)和Bov IFN-γ基因序列(M29867.1)设计2对引物。分别以犬新孢子虫基因组DNA和pET28α-IFN-γ重组质粒为模板,通过重叠延伸拼接聚合酶链式反应(SOE-PCR)将犬新孢子虫MAG1基因与IFN-γ基因拼接,构建pMD18-T-MAG1-IFN-γ克隆质粒和pGEX-4T-MAG1-IFN-γ重组表达质粒,将鉴定正确的pGEX-4T-MAG1-IFN-γ重组表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析表达产物。结果表明,SOE-PCR扩增获得双基因融...

• 出版日期2013
• 单位延边大学