牛膝ISSR-PCR反应体系的优化

作者:王强; 金则新; 祁彩虹; 李钧敏; 彭礼琼
来源:江苏农业科学, 2011, (05): 24-26.
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2011.05.103

摘要

采用改进的SDS法提取牛膝(Achyranthes bidentata)基因组DNA,利用单因素试验对ISSR反应体系中的Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、TaqDNA聚合酶用量、BSA浓度、引物用量进行筛选和优化,得出了适用于牛膝ISSR分析的扩增条件:10μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(200 mmol/L Tris.HC l,pH值8.8,100 mmol/LKC l,1%TritonX-100,100 mmol/L(NH4)2SO4,15 mmol/L MgC l2),1.5 UTaqDNA聚合酶,2 mg/mL BSA,15 ng模板DNA,10 pmol引物...

全文