重组hTRAIL腺病毒载体的构建及鉴定

作者：杨芳; 易山; 李鸿钧; 谢天宏; 施锐; 孙茂盛

来源：中国生物制品学杂志, 2007, (09): 637-641.

DOI：10.13200/j.cjb.2007.09.10.yangf.017

• 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
• 重组腺病毒
• 基因治疗
• 构建
• 鉴定 TNF-related apoptosis inducing ligand(TRAIL)
• Recombinant adenovirus
• Gene therapy
• Construction
• Identification

目的构建表达hTRAIL基因的重组腺病毒载体。方法以重组质粒pThioHisA-TRAIL中提取的TRAIL基因为模板,采用PCR法扩增基因片段。将扩增的基因片段插入穿梭质粒pShuttle-CMV,并转化大肠肝菌DH5α。筛选重组质粒pShuttle-CMV-TRAIL,电转化已转化了pAdEasy-1的BJ5183细胞。筛选重组腺病毒质粒pAdEasy-TRAIL,用Lipofectamine转染293细胞,制备携带人全长TRAIL基因的重组复制缺陷型腺病毒(Ad-TRAIL)。氯化铯密度梯度离心法纯化Ad-TRAIL病毒颗粒,并测定病毒滴度。采用RT-PCR法检测TRAIL基因在293细...

• 出版日期2007
• 单位中国医学科学院医学生物学研究所