蓝藻Synechococcus elongatus PCC7 942荧光实时定量RT-PCR实验体系的优化

作者：来盼; 李鹏飞; 蔡若淼; 蔡静; 卞乾笑; 姜雅雯; 常天亮; 赵宇玮; 许耀

来源：云南大学学报(自然科学版), 2016, (02): 307-316.

• 蓝藻
• RNA提取
• 实时定量PCR
• 生物钟基因
• 表达模式 cyanobacterium
• RNA isolation
• real-time quantitative PCR
• circadian clock genes
• expression profile

蓝藻(Synechococcu elongatus PCC 7942)是最简单的原核生物钟模式生物,研究其生物钟基因表达模式具有重要的科学意义.然而由于该蓝藻高质量RNA提取困难,目前应用荧光实时定量RT-PCR(qPCR)实验方案对其特定基因表达模式进行研究的报道较少.研究尝试通过对影响RNA提取质量的溶菌酶作用时间、起始细胞数量等因素,以及对影响qPCR反应特异性和重现性的c DNA模板浓度、引物浓度、引物退火温度等条件进行优化,初步建立了一套适用于S.elongatus PCC 7942的qPCR实验体系.结果表明震荡培养至OD750≈0.4时,取10 m L蓝藻细胞起始提取实验,使用3...

• 出版日期2016
• 单位西北大学