钉螺线粒体基因组DNA提取方法的优化及比较

作者：王康; 许树俊; 王逸枭; 陈文捷; 王忆楠; 于芬芳; 王少圣; 孙恩涛; 周书林

来源：中国血吸虫病防治杂志, 2017, 29(02): 159-162.

DOI：10.16250/j.32.1374.2016228

• 钉螺
• 线粒体基因组DNA
• 优化的高盐沉淀法

目的优化提取钉螺线粒体基因组DNA(mt DNA)的方法。方法应用高温裂解、蛋白酶K变温消化和醋酸钾纯化对传统的高盐沉淀法进行优化,并将优化的高盐沉淀法与蔗糖密度梯度离心法、传统的高盐沉淀法进行比较。用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和线粒体COX1基因PCR扩增产物鉴定提取的mt DNA,并用核ITS基因PCR扩增产物检测有无核DNA污染。结果优化的高盐沉淀法获得的mt DNA浓度和产量较高,差异有统计学意义(F=3 032.65、10185.00,P均<0.01)。用凝胶电泳检测后未发现核DNA与蛋白质污染,质量可满足于PCR、测序等分子生物学研究。结论优化的高盐沉淀法简易高效,成本低,获得的mt DNA能满足相关分析要求。

• 出版日期2017
• 单位皖南医学院