可溶性重组全长人PPARγ的表达、纯化及功能表征

作者：夏铸; 张万萍; 兰作平; 王宇; 王杰; 余瑜

来源：世界科技研究与发展, 2012, (03): 456-460.

DOI：10.16507/j.issn.1006-6055.2012.03.001

• 过氧化物酶体增殖物激活受体
• 可溶性表达
• 纯化
• 功能鉴定 full length human PPARγ
• soluble expression
• purification
• functional characterization

目的建立可溶性表达、纯化有活性的重组全长人PPARγ蛋白的方法。方法构建pReceiver-B13-SUMO-PPARγ质粒转化至EscherichiacoliBL_(21)(DE_3)细胞,进行诱导表达,优化细胞生长环境;利用亲和色谱法纯化可溶性重组全长人PPARγ蛋白;以罗格列酮为阳性配体,以GW9662为拮抗剂,采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定重组全长人PPARγ蛋白与配体药物的结合活性。结果在优化条件(16℃、IPTG浓度0.4mM、诱导时间18～20h)下能获得高水平、可溶性重组全长人PPARγ蛋白;经亲和色谱一次纯化,得到纯度约为90%的重组全长人PPAR...

• 出版日期2012
• 单位重庆医药高等专科学校; 重庆医科大学