多重PCR-变性高效液相色谱法快速检测结核致病菌群并同步鉴别致病菌种

作者：陈茹; 高小博; 郭爱珍; 刘志玲; 吴晓薇; 朱道中

来源：畜牧兽医学报, 2012, (09): 1504-1510.

• 变性高效液相色谱
• 结核分枝杆菌复合群
• 结核分枝杆菌
• 牛分枝杆菌 denaturing high-performance liquid chromatography
• Mycobacterium tuberculosis complex
• M.tuberculosis
• M.bovis

本研究旨在运用多重PCR联合变性高效液相色谱(DHPLC)技术原理,建立快速检测人兽结核致病菌群并鉴别主要致病菌种的新方法。建立了四重PCR-DHPLC方法,可同时检测结核分枝杆菌复合群(MTC)特异的IS6110和IS1081插入序列、结核分枝杆菌特异结构基因和牛分枝杆菌特异结构基因共4个目标基因。采用13种分枝杆菌标准菌株和分离株以及23种常见微生物样品进行特异性试验,采用纯化标准菌株DNA以及克隆了扩增序列的重组质粒DNA进行检测灵敏度试验,采用从临床疑似发病牛群采集的牛组织样品进行临床检测试验,并与细菌分离培养方法进行比对。结果表明:所建立的多重PCR-DHPLC方法能特异检测MTC并...

• 出版日期2012
• 单位中华人民共和国广东出入境检验检疫局; 华中农业大学